青花菜原生质体培养和根癌农杆菌介导的遗传转化

	青花菜原生质体培养和根癌农杆菌介导的遗传转化
其他题名	The Culture of Brassica Oleracea var. otalica Protoplast and Genetic Transformation Initiated by Agrobacterium Tumefaciens
	任真
学位类型	硕士
导师	孙敬三
	1993
学位授予单位	中国科学院植物研究所
学位专业	植物生理学
关键词	青花菜根癌农杆菌遗传转化分子杂交
摘要	从4-5天龄青花菜(Brassica oleracea var．italica)下胚轴游离原生质体，经纯化后培养在简化的KMsP培养基上，原生质体分裂形成了细胞团；同时，对影响外源DNA导入子叶和下胚轴原生质体后瞬间表达强度的若干因素作了较详细的研究，这些因素包括转化介质中二价阳离子的种类和浓度、PEG溶液的浓度以及PEG溶液的pH值，为进一步进行原生质体水平上的细胞遗传转化创造了条件。以青花菜(Brassica oleracea var．italica)子叶和下胚轴为外植体材料，进行了根癌农杆菌介导的遗传转化研究。在建立了子叶和下胚轴外植体组织培养的高频率植株再生系统的基础上，用携带有双元载体质粒的根癌农杆菌(Asrobacterium,tumefaciens)A208sE感染青花菜子叶和下胚轴，对根癌农杆菌的感染过程以及影响抗性芽分化频率的诸多因素作了详细研究，再生了具有卡那霉素抗性的完整转化植株。Dot Blot分析表明NPTⅡ酶活性的存在；以pROA93经EcoRI /HindⅢ酶切产生的gus基因片段(约2.6Kb)为探针进行Southern Blot分子杂交，结果表明gus基因已整合到植物细胞基因组中，并且得到了表达。
页数	114
语种	中文
文献类型	学位论文
条目标识符	http://ir.ibcas.ac.cn/handle/2S10CLM1/13775
专题	中科院植物分子生理学重点实验室
作者单位	中国科学院植物研究所
第一作者单位	中国科学院植物研究所
推荐引用方式 GB/T 7714	任真. 青花菜原生质体培养和根癌农杆菌介导的遗传转化[D]. 中国科学院植物研究所,1993.

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199307.pdf（7840KB）	学位论文		开放获取	CC BY-NC-SA	浏览请求全文