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沙冬青抗冻组份的分离纯化和afp基因克隆的尝试 | |
其他题名 | Extraction and Purification of Antifreeze Compounds in Ammopiptanthus mongolicus and Try for afp Gene Clone |
江勇 | |
学位类型 | 博士 |
导师 | 谭克辉 ; 费云标 |
1997 | |
学位授予单位 | 中国科学院植物研究所 |
学位专业 | 植物生理学 |
关键词 | 沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus 抗冻 热稳定蛋白 热滞活性 层析 逆转录- PCR |
摘要 | 本文用三种方法分离纯化沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus)叶片抗冻蛋白质。从70%硫酸铵沉淀后的上清液中得到了一种碱性的小分子物质,UiS,具有较高的溶解度( 260 mg/ml)和较强的降低溶液冰点的能力(200 mg/ml,冰点小于-20℃):从10%硫酸铵和26%氯化铵共沉淀物中分离到一种抗冻蛋白-B3,B3分子量为39.8 kDa,热滞活性为0.45℃(10 mg/ml):从沙冬青叶片热稳定蛋白质中用双向电泳一电泳回收法分离到afp,其分子量为40 kDa,pl为9.0。热滞活性为0.9℃(20 mg/ml),和其他抗冻蛋白质进行比较,没有发现相同的类型。afp和uis在叶片含量都很高,可能是沙冬青抗冻生理过程中两种主要物质,它们对于沙冬青抵御-20℃左右的冷冻温度具有重要的意义。afp N端序列为SDDL SFTF NKFV PCQT DILF,据此合成了六段5’引物和一段3’引物,用RT - PCR方法从叶片中扩增出一段200 bp左右的片段。 |
页数 | 53 |
语种 | 中文 |
文献类型 | 学位论文 |
条目标识符 | http://ir.ibcas.ac.cn/handle/2S10CLM1/13872 |
专题 | 中科院植物分子生理学重点实验室 |
作者单位 | 中国科学院植物研究所 |
第一作者单位 | 中国科学院植物研究所 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 江勇. 沙冬青抗冻组份的分离纯化和afp基因克隆的尝试[D]. 中国科学院植物研究所,1997. |
条目包含的文件 | ||||||
文件名称/大小 | 文献类型 | 版本类型 | 开放类型 | 使用许可 | ||
199717.pdf(6767KB) | 学位论文 | 开放获取 | CC BY-NC-SA | 浏览 请求全文 |
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