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分子调控咖啡酸-O-甲基转移酶(COMT)对木质素合成及植物生长发育的影响
其他题名The effects of molecular regulation of caffeic acid 3-O-methyltransferase on lignin biosynthesis and plant growth and development
徐洋
学位类型硕士
导师马庆虎
2003
学位授予单位中国科学院植物研究所
学位专业细胞生物学
关键词小麦 烟草 木质素 咖啡酸-O-甲基转移酶 花粉管通道法 分子调控 生长发育
摘要本论文由两部分组成,一、构建来自小麦的COMT的反义表达载体,转化烟草,研究抑制内源COMT对植物木质素合成及其生长发育的影响;二、利用花粉管通道法,将正义和反义COMT基因转化小麦,获得转基因小麦,从而进一步分析。 一、 反义抑制COMT对植物木质素合成及其生长发育的影响 构建含有小麦的咖啡酸-O-甲基转移酶(COMT)cDNA的反义表达载体, 利用农杆菌法转化烟草。 PCR, PCR-Southern 检测显示目的基因片段成功转入烟草基因组。处于营养生长期的转基因植株表型与对照没有明显差异;而发育成熟的转基因植株的植株矮化,茎部木质素含量与对照差异不大,木质素的组成S/G比下降,部分木质部细胞发生变形。我们还发现转基因烟草种子发芽率提高,移栽2个月的子一代转基因植株光合速率、蒸腾速率有所增强。结果表明通过反义抑制COMT将影响木质素合成,并在不同的发育阶段,影响着植物的生长发育。 二、 利用花粉管通道法获得转基因小麦 将构建好的含有Bar基因的正义和反义COMT表达载体利用花粉管法转化两个小麦品种(H4564和C6001),共获得转基因处理的种子1117颗,重新播种后,发育成苗分别为321株,总成苗率为28.7%。通过除草剂PPT筛选,分别获得PPT抗性植株31株。PCR检测抗性植株,获得PCR检测阳性植株5株,总阳性率为0.45%。阳性植株分别为H4564反义处理株1株,C6001的正义和反义处理株各2株。对小麦的植株高度,分蘖数等生理性状的分析发现,转基因小麦的分蘖数减少,植株高度降低。这些生理性状的改变与COMT基因转化的关系将有待于进一步验证。
语种中文
文献类型学位论文
条目标识符http://ir.ibcas.ac.cn/handle/2S10CLM1/14087
专题中科院植物分子生理学重点实验室
作者单位中国科学院植物研究所
第一作者单位中国科学院植物研究所
推荐引用方式
GB/T 7714
徐洋. 分子调控咖啡酸-O-甲基转移酶(COMT)对木质素合成及植物生长发育的影响[D]. 中国科学院植物研究所,2003.
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