莱茵衣藻“细菌型”pepc2基因叶绿体表达及其对油脂蛋白质含量的影响

IB-CAS > 中科院光生物学重点实验室

	莱茵衣藻“细菌型”pepc2基因叶绿体表达及其对油脂蛋白质含量的影响
	冯思豫 ; 施定基 ; 贾晓会 ; 朱嘉诚 ; 米华玲 ; 贾睿 ; 何培民
	2017
发表期刊	上海海洋大学学报
ISSN	1674-5566
卷号	26 期号:05 页码:641-650
摘要	磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(Phosphoenolpyruvate carboxylase,PEPC,EC 4.1.1.31)在植物碳代谢中有重要作用,高等植物中PEPC可以调控蛋白质和脂肪酸含量,但是对绿藻PEPC的研究还较少。莱茵衣藻是绿藻中的模式生物,其基因工程中外源基因的转化以叶绿体转化效率最高,为了提高外源蛋白表达和获得高产油莱茵衣藻,利用叶绿体转化法能进一步提高表达效率。因此,本研究首先克隆了莱茵衣藻"细菌型"PEPCCSⅠ(conserved sequenceⅠ)的639 bp,构建了p ASap I-reve-Crpepc2和p ASap I-forw-Crpepc2正反向叶绿体表达载体,并用基因枪法转化莱茵衣藻cc-400获得了空质粒型,正向型和反向型转基因藻株。其次,应用RTq PCR方法检测Crpepc2的相对表达量,结果表明反向型Crpepc2的表达量减少了89.97%,而正向型增加了201.16%。最后,检测了总蛋白和脂质含量的变化,正向型突变株的总蛋白增加了37.03%;而反向型突变株的脂质含量增加了70.32%,且不饱和脂肪酸含量明显增加。以上结果证明莱茵衣藻"细菌型"PEPC的叶绿体表达不仅可以进一步提高蛋白质与脂肪酸含量,也可为今后外源蛋白的表达和高产油工程藻的应用做贡献。
关键词	莱茵衣藻磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC) 叶绿体表达 RT-q PCR 脂肪酸蛋白质
语种	中文
资助机构	国家高技术研究发展计划(2009AA064401)
文献类型	期刊论文
条目标识符	http://ir.ibcas.ac.cn/handle/2S10CLM1/23717
专题	中科院光生物学重点实验室
作者单位	1.上海海洋大学水产与生命学院 2.中国科学院植物研究所 3.中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所
推荐引用方式 GB/T 7714	冯思豫,施定基,贾晓会,等. 莱茵衣藻“细菌型”pepc2基因叶绿体表达及其对油脂蛋白质含量的影响[J]. 上海海洋大学学报,2017,26(05):641-650.
APA	冯思豫.,施定基.,贾晓会.,朱嘉诚.,米华玲.,...&何培民.(2017).莱茵衣藻“细菌型”pepc2基因叶绿体表达及其对油脂蛋白质含量的影响.上海海洋大学学报,26(05),641-650.
MLA	冯思豫,et al."莱茵衣藻“细菌型”pepc2基因叶绿体表达及其对油脂蛋白质含量的影响".上海海洋大学学报 26.05(2017):641-650.

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